
唾液酸含量分析
實(shí)驗(yàn)背景
糖基化(N-糖基,O-糖基化)是真核細(xì)胞蛋白質(zhì)最重要的一類翻譯后修飾。唾液酸存在于糖蛋白糖鏈的非還原末端。唾液酸(SA)是一類神經(jīng)氨酸的衍生物,含有9個(gè)碳原子并具有吡喃糖結(jié)構(gòu)的酸性氨基糖,它通常位于糖蛋白糖基的非還原末端,其中N-乙酰神經(jīng)氨酸(NANA)是唾液酸最主要的形式。唾液酸含量影響抗體藥物的半衰期、生物活性等。因而,唾液酸含量分析也成為生物藥物研發(fā)的重要步驟,在工藝開(kāi)發(fā)、制造純化、劑型開(kāi)發(fā)和穩(wěn)定性測(cè)試等過(guò)程中需監(jiān)測(cè)唾液酸結(jié)構(gòu)與相對(duì)含量。高效液相色譜法(HPLC)為唾液酸含量的測(cè)定的常見(jiàn)方法之一,而高分辨液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù),可以作為正交補(bǔ)充。
適用樣本
具有唾液酸修飾的糖型,比如大分子生物藥(諸如單抗、Fc融合蛋白、雙抗、多抗、ADC類)等
主要設(shè)備
1260 InfinityⅡ hplc, Aglient等或Fisher QE HF-X, Thermo
送樣要求
建議提供>600 ug的目標(biāo)成分,濃度1mg/ml以上。具體送樣要求請(qǐng)跟商務(wù)溝通后確認(rèn)。
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