
圓二色光譜遠、近紫外掃描分析
實驗背景
在蛋白質(zhì)或多肽中主要的光活性基團是肽鏈骨架中的肽鍵、芳香氨基酸殘基及二硫鍵等。圓二色譜技術(shù)是一種比較簡單且有效的技術(shù),利用蛋白質(zhì)的圓二色性及不對稱分子對左右圓偏振光吸收的不同來進行結(jié)構(gòu)分析,可以在較接近其生理狀態(tài)的溶液中測定,是目前研究蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的主要手段之一,并廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)的構(gòu)象研究中。采集分析物在遠紫外(190-260 nm)及近紫外(250-340 nm)的圓二色吸收圖譜,并通過軟件分析其螺旋(helix)、β-折疊(beta-pleated sheet,包含Antiparallel及Parallel)、轉(zhuǎn)角(beta-turn)和不規(guī)則卷曲(Random coil)等二級結(jié)構(gòu),同時可以通過overlay和qBIC一致性分析去整合多批次樣本結(jié)果,分析其結(jié)構(gòu)一致性。
適用樣本
多肽、蛋白類、核酸類藥物等
主要設(shè)備
Chirascan PLUS V100 , Applied Photophysics
送樣要求
遠紫外掃描,建議提供≥0.5mg的目標(biāo)成分;
近紫外掃描,建議提供≥1.5mg的目標(biāo)成分。
如樣品含有復(fù)雜輔料成分,需要跟對應(yīng)商務(wù)溝通后確認具體送樣要求;
如樣品需要特殊處理比如透析等,需要需要跟對應(yīng)商務(wù)溝通。
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